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白芨有效成分的提取及功效评价(6)

时间:2017-06-08 15:11来源:毕业论文
(2)醇沉体积 在醇沉条件为70%乙醇,醇沉5h,加入不同体积的乙醇,探索乙醇的加入量对醇沉效果的影响。 (3)醇沉时间 在醇沉条件为乙醇浓度70%,4倍


  (2)醇沉体积
    在醇沉条件为70%乙醇,醇沉5h,加入不同体积的乙醇,探索乙醇的加入量对醇沉效果的影响。
  (3)醇沉时间
    在醇沉条件为乙醇浓度70%,4倍于提取液体积的乙醇,选择不同的醇沉时间探索其对醇沉效果的影响
2.4.4 响应面优化
  (1)水提工艺优化
     根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理单因素影响实验结果,选取浸提取时间、水料比、提取温度对白芨多糖浸提影响显著的三个因素,在单因素试验的基础上采用三因素三水平的响应面分析方法,以优化水提工艺。【12】
  (2)醇沉条件优化
     根据Box-Benhnken的中心组合实验设计原理单因素影响实验结果,选取乙醇浓度、醇沉体积、醇沉时间对多糖沉淀影响显著的三个因素,在单因素实验的基础上采取三因素三水平的响应面优化方法,得到最佳醇沉条件。
2.4.5 提取液多糖含量的测定
(1)总糖的测定【13】
    1)40ug/mL葡萄糖标液的配置
     精密称取干燥至恒重的葡萄糖0.040g,置于50mL烧杯。加入20mL蒸馏水溶解,溶解移入100mL容量瓶。用蒸馏水50mL分三次洗涤烧杯,洗涤液移入容量瓶。最后蒸馏水定容,摇匀备用。是为标准溶液。
2)6%苯酚试剂的配置
 苯酚常温下为固态,用之前放入水浴中加热融化,用50mL小烧杯称取6g苯酚,加水转移到100mL容量瓶中,定容至100mL。4℃冰箱中保存备用。
3)标准曲线的制作
表2.1 苯酚硫酸法测定白芨提取液总糖
试管编号    0    1    2    3    4    5    6    7    8

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标准溶液(mL)    0    0.4    0.6    0.8    1.0    1.2    1.4    1.6    1.8
蒸馏水(mL)    2    1.6    1.4    1.2    1.0    0.8    0.6    0.4    0.2
6%苯酚(mL)    1    1    1    1    1    1    1    1    1
浓硫酸(mL)    5    5    5    5    5    5    5    5    5
            静置10min后,振荡器摇匀            
            室温静置20min            
     按表2.1将个试管编号后加入溶液。
以0号管为空白校正,于波长490nm处检测其他各管吸光度。
4) 样品测定
     按下表加入提取液测其吸光度值。
表2.2 样品总糖检测
试管编号    S1    S2    S3
提取液(mL)    1    1    1
蒸馏水(mL)    1    1    1
6%苯酚(mL)    1    1    1
浓硫酸(mL)    5    5    5
5)计算方法
     以0~9号管的吸光度作为横坐标(X),对应浓度为纵坐标值(Y),用Oringin作图,显示公式和R平方值,得到浓度和吸光度之间的线性关系,把S1,S2,S3吸光度取平均值后带入线性方程中,得出样品溶液总糖含量C0。 白芨有效成分的提取及功效评价(6):http://www.lwfree.cn/shengwu/20170608/8717.html
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